Ключові слова
імуногістохімія
PRP
комбіновані місцеві препарати
комплексне лікування
регенерація тканин
макрофаги
запалення
ендотеліальні клітини
мікросудинна щільність
Як цитувати
Анотація
Актуальність. Хронічні рани супроводжуються тривалим запаленням, порушенням ангіогенезу та ремоделюванням тканинного мікрооточення, що ускладнює репарацію і знижує ефективність лікування. Імуногістохімічна оцінка маркерів CD34, CD68 та CD163 на тлі комплексного лікування комбінованими місцевими препаратами та ад’ювантним PRP, доповнена аналізом PRP-асоційованих клітинних і гуморальних показників, дозволяє деталізувати співвідношення між неоваскуляризацією, макрофагальною інфільтрацією та лабораторними ознаками репарації тканин.
Мета. Провести порівняльний аналіз експресії імуногістохімічних маркерів CD34, CD68 та CD163 у тканинах пацієнтів із хронічними ранами до та після комплексного лікування із застосуванням комбінованих місцевих препаратів та ад’ювантного PRP, а також оцінити додаткові клітинні та гуморальні показники репаративної динаміки.
Матеріали та методи. Проведено порівняльне морфологічне, імуногістохімічне та клініко-лабораторне дослідження біопсійного матеріалу і локальних показників ранового мікрооточення у 40 пацієнтів із хронічними ранами. Контрольну групу становили 20 пацієнтів, які отримували стандартне лікування; в основній групі оцінювали матеріал до початку лікування та після комплексного лікування, основу місцевої складової якого становили комбіновані препарати, а PRP застосовували як ад’ювантний компонент. Експресію CD34, CD68 та CD163 визначали у репрезентативних полях зору при збільшенні ×400. Додатково аналізували клітинний склад ранових відбитків, НСТ-тест нейтрофільних гранулоцитів і моноцитів, а також TGF-фактор, активні форми кисню, фібронектин, кальпаїн та прозапальні цитокіни у 1, 7 та 14 добу.
Результати. Після лікування частка CD34-позитивних клітин зростала з 6,92% до 26,77%, що свідчило про активацію ангіогенезу. Одночасно спостерігалося зниження кількості CD68-позитивних клітин з 67,83% до 27,05% та CD163-позитивних клітин з 73% до 40,9%, що відображало зменшення макрофагальної інфільтрації та перебудову тканинного мікрооточення. В основній групі, що отримувала комбіновані місцеві препарати з ад’ювантним PRP, додатково встановлено зниження вмісту нейтрофільних гранулоцитів у ранових відбитках з 73,3±6,0% до 55,9±6,2%, підвищення вмісту моноцитів з 3,9±1,7% до 10,2±1,2%, зростання TGF-фактору з 100,8±6,3 до 131,4±5,9 пг/мл та фібронектину з 146,6±3,9 до 182,0±2,5 пг/мл, а також зниження активних форм кисню, кальпаїну та прозапальних цитокінів.
Висновок. На тлі комплексного лікування комбінованими місцевими препаратами та ад’ювантним PRP комплексна оцінка експресії CD34, CD68 та CD163 у поєднанні з PRP-асоційованими клітинними й гуморальними показниками дозволяє охарактеризувати морфологічні та лабораторні ознаки репарації хронічних ран. Отримані дані свідчать про активацію ангіогенезу, зменшення запального макрофагального компонента та формування більш сприятливого ранового мікрооточення.
Посилання
Nussbaum, S. R., Carter, M. J., Fife, C. E., DaVanzo, J., Haught, R., Nusgart, M., et al. (2018). An economic evaluation of the impact, cost, and Medicare policy implications of chronic nonhealing wounds. Value Health, 21(1), 27–32. https://doi.org/10.1016/j.jval.2017.07.007
Arif, M., Khan, S. M., Gull, N., Tabish, T. A., Zia, S., Khan, R. U., et al. (2021). Polymer-based biomaterials for chronic wound management: promises and challenges. International Journal of Pharmaceutics, 598, 120270. https://doi.org/10.1016/j.ijpharm.2021.120270
Eming, S. A., Martin, P., & Tomic-Canic, M. (2014). Wound repair and regeneration: mechanisms, signaling, and translation. Science Translational Medicine, 6(265), 265sr6. https://doi.org/10.1126/scitranslmed.3009337
Peña, O. A., & Martin, P. (2024). Cellular and molecular mechanisms of skin wound healing. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 25(8), 599–616. https://doi.org/10.1038/s41580-024-00715-1
De Palma, M., Biziato, D., & Petrova, T. V. (2017). Microenvironmental regulation of tumour angiogenesis. Nature Reviews Cancer, 17(8), 457–474. https://doi.org/10.1038/nrc.2017.51
Annese, T., Tamma, R., De Giorgis, M., & Ribatti, D. (2020). microRNAs biogenesis, functions and role in tumor angiogenesis. Frontiers in Oncology, 10, 581007. https://doi.org/10.3389/fonc.2020.581007
Siemerink, M. J., Klaassen, I., Vogels, I. M. C., Griffioen, A. W., Van Noorden, C. J. F., & Schlingemann, R. O. (2012). CD34 marks angiogenic tip cells in human vascular endothelial cell cultures. Angiogenesis, 15(1), 151–163. https://doi.org/10.1007/s10456-011-9251-z
Wynn, T. A., & Vannella, K. M. (2016). Macrophages in tissue repair, regeneration, and fibrosis. Immunity, 44(3), 450–462. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2016.02.015
Willenborg, S., Sanin, D. E., Jais, A., Ding, X., Ulas, T., Nüchel, J., et al. (2021). Mitochondrial metabolism coordinates stage-specific repair processes in macrophages during wound healing. Cell Metabolism, 33(12), 2398–2414.e9. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2021.10.004
Krzyszczyk, P., Schloss, R., Palmer, A., & Berthiaume, F. (2018). The role of macrophages in acute and chronic wound healing and interventions to promote pro-wound healing phenotypes. Frontiers in Physiology, 9, 419. https://doi.org/10.3389/fphys.2018.00419
Hesketh, M., Sahin, K. B., West, Z. E., & Murray, R. Z. (2017). Macrophage phenotypes regulate scar formation and chronic wound healing. International Journal of Molecular Sciences, 18(7), 1545. https://doi.org/10.3390/ijms18071545
Kong, Q., Gao, S., Li, P., Sun, H., Zhang, Z., Yu, X., et al. (2024). Calcitonin gene-related peptide-modulated macrophage phenotypic alteration regulates angiogenesis in early bone healing. International Immunopharmacology, 130, 111766. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2024.111766
Okonkwo, U. A., & DiPietro, L. A. (2017). Diabetes and wound angiogenesis. International Journal of Molecular Sciences, 18(7), 1419. https://doi.org/10.3390/ijms18071419
Radu, P., Zurzu, M., Paic, V., Bratucu, M., Garofil, D., Tigora, A., et al. (2023). CD34: structure, functions and relationship with cancer stem cells. Medicina (Kaunas), 59(5), 938. https://doi.org/10.3390/medicina59050938
Kumar, V., Abbas, A. K., & Aster, J. C. (Eds.). (2018). Robbins Basic Pathology (10th ed.). Elsevier. https://shop.elsevier.com/books/robbins-basic-pathology/kumar/978-0-323-35317-5
Dabbs, D. J. (Ed.). (2021). Diagnostic Immunohistochemistry: Theranostic and Genomic Applications (6th ed.). Elsevier. https://shop.elsevier.com/books/diagnostic-immunohistochemistry/dabbs/978-0-323-72172-1
Swain, S. S., Karri, V. V. S. R., Uddin, M. E., Gowthamarajan, K., Bhaskaran, M., & Subramaniyan, V. (2025). Advances in diabetic wound healing: from pathophysiology to emerging therapies. Acta Diabetologica. https://doi.org/10.1007/s00592-025-02629-6
Griffioen, A. W., & Dudley, A. C. (2022). The rising impact of angiogenesis research. Angiogenesis, 25(4), 435–437. https://doi.org/10.1007/s10456-022-09849-2
Woo, K., González, C. V. S., Amdie, F. Z., & de Gouveia Santos, V. L. C. (2024). Exploring the effect of wound-related pain on psychological stress, inflammatory response, and wound healing. International Wound Journal, 21(7), e14942. https://doi.org/10.1111/iwj.14942
Gruber, E., Heyward, C., Cameron, J., & Leifer, C. (2018). Toll-like receptor signaling in macrophages is regulated by extracellular substrate stiffness and Rho-associated coiled-coil kinase (ROCK1/2). International Immunology, 30(6), 267–278. https://doi.org/10.1093/intimm/dxy027
Bankhead, P., Loughrey, M. B., Fernández, J. A., Dombrowski, Y., McArt, D. G., Dunne, P. D., et al. (2017). QuPath: open source software for digital pathology image analysis. Scientific Reports, 7, 16878. https://doi.org/10.1038/s41598-017-17204-5
Rodrigues, M., Kosaric, N., Bonham, C. A., & Gurtner, G. C. (2019). Wound healing: a cellular perspective. Physiological Reviews, 99(1), 665–706. https://doi.org/10.1152/physrev.00067.2017
Altman, D. G., & Bland, J. M. (1999). Statistics notes: variables and parameters. BMJ, 318, 1667. https://doi.org/10.1136/bmj.318.7199.1667
McHugh, M. L. (2013). The chi-square test of independence. Biochemia Medica (Zagreb), 23(2), 143–149. https://doi.org/10.11613/bm.2013.018
Qu, W., Wang, Z., Hunt, C., Morrow, A. S., Urtecho, M., Amin, M., et al. (2021). The effectiveness and safety of platelet-rich plasma for chronic wounds: a systematic review and meta-analysis. Mayo Clinic Proceedings, 96(9), 2407–2417. https://doi.org/10.1016/j.mayocp.2021.01.030
Meznerics, F. A., Fehérvári, P., Dembrovszky, F., Kovács, K. D., Kemény, L. V., Csupor, D., et al. (2022). Platelet-rich plasma in chronic wound management: a systematic review and meta-analysis of randomized clinical trials. Journal of Clinical Medicine, 11(24), 7532. https://doi.org/10.3390/jcm11247532
Salgado-Pacheco, V., Serra-Mas, M., & Otero-Viñas, M. (2024). Platelet-rich plasma therapy for chronic cutaneous wounds stratified by etiology: a systematic review of randomized clinical trials. Drugs & Therapy Perspectives, 40, 31–42. https://doi.org/10.1007/s40267-023-01044-7
OuYang, H., Tang, Y., Yang, F., et al. (2023). Platelet-rich plasma for the treatment of diabetic foot ulcer: A systematic review. Frontiers in Endocrinology, 14, 1256081. https://doi.org/10.3389/fendo.2023.1256081
Dai, J., Jiang, C., Sun, Y., et al. (2020). Autologous platelet-rich plasma treatment for patients with diabetic foot ulcers: A meta-analysis of randomized studies. Journal of Diabetes and Its Complications, 34(8), 107611. https://doi.org/10.1016/j.jdiacomp.2020.107611
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.